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[http://www.lillo.org.ar/phylogeny/tnt/ TNT] 是一个专注于 MP 的系统发育软件,其以上个世纪的风格、很烂的 option 设计、难用的 PISH Shell、不规范的输出格式、多样的搜索策略、更多的 resample 方法以及更好的搜索速度著称。 [https://doi.org/10.1111/cla.12476 其作者声称]该软件较 PAUP* 的搜索能力强。 ==基础文件== ===声明部分=== TNT 文件头文件,ntax 和 nchar 是与 nexus 文件相同的,在实际文件中<pre>xread 'comments comments' nchar ntax</pre> ===数据部分=== 但是数据本身没有<code>END;</code>,例如下面的示例<pre>Acusta_despecta_no_128 gctatttctgctcaatgt-ttct-ataaatagccgcagtactttgactgtgcaaaggtagcataatca-attgacttataatt--gaagtctggaatgaaagaatctatggggaaatactgtttcattttgg-tggtaggaaattatt-tattaggtgaaaaaacctataagtaaaaaatagacgagaagacccttgaaattttaattttgttggggcgacaaagtagcaataga-aaacctacttaga--gaatatgtattat--ttataaaggttaaataaattactctagggataacagcataatatttaaaagtttgtgacct-cgatgttgga-ctaggaa-aata-tagtttaga Aegista_diversifamilia_CWH_2014_S24_3 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------taaaattgct-tatcaggtgaaaatacctgactatatataatagacgaaaagaccctggaaatttttattttgttggggcgacagaataacaaat----aacttatttatatataatttgccattt--gtaaataaaataaataaattactccagggataacagcataatatttaaaagtttgtgacct-cgatgttgga-ctaggaa-ttta-tagttcaga Amphidromus_contrarius_AM_C_468737 gttttttctgctcaatga-aaat-ttaaatggccgcagtaccctgactgtgcaaaggtagcataatca-gttggcttataatt--gaagtctggaatgaatgaataaacggagggtagctgtgtcttactga-aaccatgaacttattaaagtaagtgaaaatacttacattaaaataatagacgagaagaccctagaaatttgaattttgttggggcgacaaaatagcaagt---taacctatttacg-tgtacaagtgctaaa---ttgtgggtatgaataattactctagggataacagcataatttattaaagattgtgacct-cgatgttgga-ctaggaa-attc-aagttcaga Camaena_cicatricosa_GP4 gcattttctgctcaatga--tat-ttaaatagccgcagtactctgactgtgcaaaggtagcataataa-tttggcttataatt--gaagtcttgtatgaacgaatacatggggaataactatatcaacaatg-taaaatgaaattact-aaatacgtgcaaatacgtatatttacataaaagacgagaagaccctagaaatttttattttgctggggcggcatagtaacatga----aacttacattat-tatacaagaagtgataatttgcagaatgattaaattactctagggataacagcataatttactatagtttgtgacct-cgatgttgga-ttaggaa-gttg-aaatttaga ;</pre> ===group=== group 在 tnt 中有三种,tree group <code>tgroup</code>, character <code>xgroup</code>, taxa group <code>agroup</code>。在文件底下定义。 <code>A_</code>其实是 taxname 前缀<pre>agroup =0 (ACANTHOGONATUS) A_ =1 (CHACO) Cha_ =2 (STENOTEROMMATA) St_ H_ =4 (LYCINUS) L_ =5 (DIPLOTHELOPSIS) D_ =6 (PYCNOTHELE) Pyc_ =7 (RACHIAS) Rac_ =8 (BARYCHELIDAE) Neod_ Bar Trich Cosmo ;</pre>也可以按照数字来定义范围<pre>agroup =0 (extant) 0,37 =1 (fossils) 38,49 xgroup =0 (mor) 0,195 =1 (dna) 196,39294</pre> ==常用操作== 可以将下列的命令写到 txt 文件,让 TNT 直接运行 ===准备=== <code>mxram</code> 是记录多少 MB 内存可用;<code>nstates</code> 声明文件类型:<code>32</code> 32离散字符,<code>con</code> 连续字符,<code>protein</code> 蛋白质,<code>dna</code> DNA;<code>NOGAPS</code>是不把 gap 视作别的字符状态。<pre>mxram 10240 ; nstates 32 ; nstates NOGAPS ;</pre> ===操作=== <code>procedure</code> 打开;<code>log</code> 产生 log 文件;<code>taxname</code> 是在最终的树中使用名称,<code>-</code> 是默认的,不用名字,<code>=</code> 则是使用名字<pre>procedure filename.tnt ; log logfile ; taxname= ;</pre><code>quit</code> 是退出<pre>quit;</pre> ===搜索=== <code>hold</code> 在 RAM 中保留 999 个树;<code>mult</code> 是传统搜索 <code>replic</code> 是多少次重复,<code>tbr</code> 是 Tree Bisection Reconnection 搜索策略,99个树被保存<pre>hold 999 ; mult=replic 100 tbr hold 99;</pre>`bbreak 是搜索策略设置,可以是 TBR SPR (Subtree Pruning Regrafting),<pre>bbreak=tbr ;</pre> ===合意=== consensus 的方式有几种:严格合意树 <code>nelsen</code>; 半合意树 <code>comcomp</code>;多数合意树 <code>majority</code>。<code>*</code> 是把合意树作为最后一个树保存在内存里。<pre>majority * ;</pre> ===Resample=== Resample 有几种,如 boostrap:<code>boot</code>;jackifing:<code>jak</code>。<code>replications</code> 是重复次数。<pre>resample boot replications 1000;</pre> ===导出=== <code>export</code>是导出 nexus 树文件,<code>=</code> 纯 newick 文件,<code><</code> 保存 tags 为树的 labels。 <code>ttags</code> 是 tag 相关的设置,<code>=</code> 是保存树的 tag,要在树发生之前。<code>&</code> 是输出为 svg 图片,<code>thickness</code> 是树的粗细,<code>italics</code> 是样本名称斜体,<code>fontsize</code> 是样品名称大小。<pre>export= trees.tre ; ttags= ; resample boot replications 1000; ttags & bt.svg thickness 7 italics fontsize 15; export < bt.tre ;</pre> ===TL, CI & RI=== <code>length</code>记录树长(Tree Length),<code>stats.run</code> 是一个计算 CI RI 的脚本<pre>length * ; stats.run;</pre><code>stats.run</code> 内容如下<pre>macro= ; report- ; var = 0 themin 1 themax + CIs [ ( ntrees + 1 ) ] + RIs [ ( ntrees + 1 ) ] + this ; set themin minsteps ; set themax maxsteps ; loop 0 ntrees progress #1 (ntrees+1) Calculating indices... ; set this length[#1] ; set CIs[#1] 'themin'/'this' ; set RIs[#1] ('themax'-'this')/('themax'-'themin') ; stop progress/ ; report= ; macfloat 3 ; maketable CIs Consistency index ; maketable RIs Retention index ; proc/ ;</pre> ===Weighting=== <code>piwe</code> 确定 k 值,根据 [https://doi.org/10.1111/cla.12205 Goloboff ''et al.'' (2018)],一般 k 应该在 3 到 12 之间,数量级越大的数据,往往 k 越大越可以获得更好的结果。但是自认为 k 应该凭借连续 k 产出的 CI RI 进行判断,从而选择最佳的 k 。 <code>piwe</code> 应该在输入文件前定义。 <code>xpiwe(*</code> 则是自动对空位降低 weighting。 对于二者,<code>&</code> 则是输出相关 weighting 设置。 ===Outgroup=== 设置多个外群可以通过 <code>force</code> 以及 <code>constrain</code> 操作 假设现在有 <code>26</code> 个样本,<code>0</code> 和 <code>1</code> 是外群则这样设置 <pre> force + [2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25]; constrain=; </pre> ==示例== 记得修改 <code>filename.txt</code>,也要把 <code>stats.run</code> 放在同一个文件夹下。<pre>mxram 10240 ; nstates 32 ; nstates NOGAPS ; piwe=12; procedure filename.tnt ; log tnt.log ; taxname= ; hold 9999 ; xpiwe(*; mult=replic 100 tbr hold 1000; xpiwe&; piwe&; bbreak=tbr ; majority * ; export= trees.tre ; ttags= ; resample boot replications 1000; ttags & bt.svg thickness 7 italics fontsize 15; export < bt.tre ; length * ; stats.run; quit ;</pre><code>trees.tre</code> 是搜索的树;<code>bt.tre</code> 是有 bootstrap 支持的多数合意树,但是没有树长;<code>bt.svg</code> 是有树长的,但是只是图片,但是是多数合意树的;<code>tnt.log</code> 里有 LT CI RI 的数值。 TL 示例如下<pre>Saved trees (Nexus format) to file bt.nex Tree lengths 0 0 16677</pre>CI 示例如下<pre>Consistency index 0 0 0.095</pre>RI 示例如下<pre>Retention index 0 0 0.627 </pre> [[分类:Bioinformatics]]
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